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    昨日下午，我公司吳經理收到由四川大學華西醫院李老師發來的qq會 話。李老師在本年度連續購買了6次Elisa試劑盒，上月初，李老師聯系我 司技術說想要試試自己配的試劑盒，看看檢測效果。在昨日李老師給吳經 理的會話中表示：“我的這個檢測結果不理想，不知道是哪里出了問題。 幫我看下是什么原因可以嗎？”我公司試劑盒售后客服吳經理說可以，并 為李老師安排技術解析ELISA測定結果。

          
    李老師的主要問題是：我自己合成8個氨基酸的抗原短肽，和BSA耦連 后免疫動物，1個月后用ELISA測定血清中針對抗原短肽的抗體滴度，具體 步驟：用碳酸緩沖液溶解抗原短肽后包板，4度冰箱18小時，再用1%OVA37 度封閉2小時，洗板3次。待測血清用10%小牛血清倍比稀釋，37度溫育1小 時，洗板3次，加入二抗，37度溫育40分鐘，洗板3次，加TMB顯色，結果 比較詭異，陰性對照也顯色了，且OD值和陽性差別不大。是什么原因呢？ 是洗板的問題嗎？ 

十分鐘后，技術員給李老師去電話解答。可以根據這幾個方面分析： 
1.洗板是否串孔，如串孔的話可能造成污染;你一抗、二抗每次 洗板時洗5遍以上。
2.封閉液的問題，你說陰性對照也顯色了，那主要的問題應該是封 閉，應重新考慮用OVA封閉是否適合，如果OVA封閉效果不好的話可以選擇 其他的封閉液。封閉液的選擇園子里有很多相關的帖，你搜一下看看。
3.建議ELISA試劑盒包被zui好在37度兩小時，這樣的效果可能會好一 些。
 

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